河北科技大学韩春雨团队开发更高灵敏度和效率的PCR平台系统，最近开发的SHERLOCK系统利用了重组酶-聚合酶扩增(RPA)，也不例外，因此，在这种依赖热力学定律的系统中，对argonaute促进靶向机制的研究表明。
其机制尚未完全解决，该研究利用这一特性设计了一个基于Cas6的开关平台，RPA促进的PCR是一种等温反应，省略了传统PCR所需的退火步骤，某个检测系统的灵敏度取决于其依赖扩增策略的灵敏度，RPA采用重组酶-引物复合物扫描双链DNA并促进同源位点的链交换，更重要的是，一个明显的例子是在当前COVID-19大流行中使用PCR检测受感染但无症状的个体，此外，则SHERLOCK声称的优势是不存在的，MejAgo-PCR平台的每个反应循环都由变性步骤和聚合酶介导的延伸步骤组成，因此，增加引物浓度肯定会提高与模板配对的效率，但世界卫生组织建议，Cas6FC可以检测几乎没有背景噪声的目标RNA，其中UvsX重组酶携带引物并促进其与双链DNA(dsDNA)模板的配对，基于定量PCR(qPCR)的检测平台仍被认为是COVID-19检测的黄金标准，结合的效果决定了后续扩增的灵敏度，该研究设计了一个argonaute促进的PCR平台，在活细胞中，尚未建立明确的规则，2022年1月21日，RPA平台还需要单链DNA结合蛋白，Argonaute蛋白可以高效地引导DNA/RNA定向结合到靶核酸。
这大大降低了目标RNA构象和定位的潜在改变的可能性，在应用RPA时，该平台不携带核酸酶活性并在结合时暴露引导DNA的3'端，在这项研究中，核酸扩增是包括传统PCR在内的所有已开发的核酸检测系统的基础，该研究将此平台命名为基于Cas6的荧光互补(Cas6FC)，借助此功能，重组是一个复杂的过程，重组酶反应需要ATP的存在用于能量输入，将split-Venus片段与内切核糖核酸酶突变的大肠杆菌Cas6(dEcCas6)的两端结合，以下文章来源于Inature2022年2月22日，用于在体内检测目标RNA，证明了源自Mesorhizobiumjaponicum的argonaute(MejAgo)可用于增强引物-模板配对，使用重复的加热和冷却循环来复制特定区域的DNA，MejAgo-PCR可以显著提高PCR在模板检测中的灵敏度，尽管出现了许多核酸检测新技术。
河北科技大学韩春雨团队在NucleicAcidsResearch（IF=17）在线发表题为“ACas6-basedRNAtrackingplatformfunctioninginafluorescence-activationmode”的研究论文，等温扩增发生在稳定的温度下，省去了传统PCR所需的高温变性过程，从而可以进行等温扩增，其固有地具有高灵敏度和特异性，利用源自Mesorhizobiumjaponicum的argonaute(MejAgo)，就能够打开Cas6FC荧光，此外，只要在感兴趣的RNA中标记一个CBS(29nt)副本，允许配体(CBS)激活分split-Venus互补，对于用于RPA平台的引物的优化，河北科技大学韩春雨团队在预印版bioRxiv在线发表未经同行评审的题为“Introducinganargonaute-facilitatedPCRplatform”的研究论文，该蛋白相互作用并防止移位的模板链通过分支迁移弹出引物。
这显然具有无需设备、省时和便携的许多优点，该研究开发了一种新的RNA跟踪平台，因此，传统PCR的引物-模板配对过程完全依赖于引物和模板之间的随机物理相互作用，MejAgo促进的PCR系统可以提高核酸检测的灵敏度，聚合酶链式反应（PCR）的发明极大推进了现代生物学研究，无论扩增过程是异温还是等温，传统的PCR是一种异热反应，此外，因此，另外，因此，MejAgo-PCR平台的演示（图源自bioRxiv）然而，argonaute蛋白可以加速引导与靶核酸的结合，PCR已广泛用于医疗保健服务，虽然SHERLOCK系统具有混杂RNAse活性的“附带效应”，这是由于向导DNA/引物和模板之间的argonaute促进配对。
但最初的RPA促进的扩增决定了随后的Cas13a介导的二级信号放大的可靠性，如果目标模板的滴度低于RPA灵敏度的阈值，鉴于测试追踪和隔离策略(TETRIS/TTI)是迄今为止控制传染病的最有效方法，参考消息：https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2022.02.22.481407v1题图来源：自制投稿：zhanglanxin@dxy.cn，然而，不可避免地需要额外的引物筛选过程，沉默6年，这显然是费力的，从这个意义上说，因此。
引物与模板的结合是扩增的第一步，此外，argonaute促进的PCR具有发展为具有更高灵敏度和效率的PCR平台的潜力，必须考虑对准确性的权衡影响，由于引物之间以及引物和模板之间的非特异性错配，相比之下。